肉多荤文高H羞耻玩弄校园,国产女人高潮嗷嗷嗷叫,A级毛片在线看,国产国语老龄妇女a片

熱門(mén)搜索: 肌酸激酶MB型同工酶(CK-MM)質(zhì)控樣品 抗血漿鑒別試劑盒 甲種胎兒球蛋白抗原 重組核心鏈霉親和素 2(不帶標(biāo)簽) 重組鏈霉親和素(r-ScSA)(NC膜專用) 重組鏈霉親和素(帶His標(biāo)簽) 羊抗人視-黃醇結(jié)合蛋白多克隆抗體 大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)試劑盒(ELISA) 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA試劑盒 1%豚鼠紅細(xì)胞 2%雞紅細(xì)胞 1%雞紅細(xì)胞 重組人線粒體核糖體蛋白S2(MRPS2) 重組人蛋白酶體激活物亞基1(PSME1)蛋白 重組人肝癌衍生生長(zhǎng)因子相關(guān)蛋白3 重組人FAM83A蛋白

PRODUCT CLASSIFICATION

產(chǎn)品分類

技術(shù)文章/ Technical Articles

您的位置:首頁(yè)  /  技術(shù)文章  /  實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)服務(wù)的類型

實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)服務(wù)的類型

更新時(shí)間:2018-08-14      瀏覽次數(shù):1859
   實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)服務(wù)的類型
  實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)服務(wù)所使用的熒光化學(xué)材料可分為兩大類,即熒光染料和熒光探針。熒光染料以SYBR GreenⅠ為主要代表,是非特異性熒光化學(xué)材料。熒光探針包括TaqMan、分子信標(biāo)、熒光標(biāo)記引物、雜交探針等,屬于特異性熒光材料。
  SYBR GreenⅠ是一種能夠與雙鏈DNA小溝結(jié)合的染料。在游離狀態(tài)下,SYBR GreenⅠ發(fā)出微弱的熒光,但是一旦與雙鏈DNA結(jié)合,其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng)。因此,一個(gè)反應(yīng)發(fā)出的全部熒光信號(hào)與出現(xiàn)的雙鏈DNA量成正比,可以根據(jù)熒光信號(hào)檢測(cè)出PCR體系中的雙鏈DNA的數(shù)量。其優(yōu)點(diǎn)是檢測(cè)方法簡(jiǎn)單,通用性好,價(jià)格相對(duì)較低,是許多實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展熒光定量實(shí)驗(yàn)。SYBR GreenⅠ的缺點(diǎn)在于它能夠和所有的雙鏈DNA相結(jié)合,因此由引物二聚體、單鏈二級(jí)結(jié)構(gòu)、非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物引起的熒光信號(hào)會(huì)影響定量的準(zhǔn)確性。但可以通過(guò)優(yōu)化PCR的反應(yīng)條件、選擇設(shè)計(jì)良好的引物,來(lái)減少或去除引物二聚體和非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生;另外,也可以通過(guò)對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物的溶解曲線進(jìn)行分析來(lái)判斷熒光信號(hào)的真實(shí)性。
  TaqMan探針技術(shù)是有美國(guó)Perkin Elmer(PE)公司研制的一種實(shí)時(shí)PCR定量技術(shù),在PCR擴(kuò)增加入一對(duì)引物的同時(shí)加入1個(gè)特異性的熒光探針,此熒光探針為一個(gè)30~45 bp的寡核苷酸,它設(shè)計(jì)為與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì),其5′端標(biāo)記熒光發(fā)射基團(tuán),3′端標(biāo)記熒光淬滅基團(tuán)。當(dāng)探針保持完整時(shí),3′端淬滅基團(tuán)抑制了5′端發(fā)射基團(tuán)的熒光發(fā)射。但在PCR擴(kuò)增中,模板變性后低溫退火,引物與探針同時(shí)與模板結(jié)合,在引物的介導(dǎo)下,沿模板向前延伸至探針結(jié)合處,發(fā)生鏈的置換,Taq DNA聚合酶的5′→3′外切酶活性將探針5′端連接的熒光發(fā)射基團(tuán)從探針上切割下來(lái),游離于反應(yīng)體系中,從而脫離3'端熒光淬滅基團(tuán)的屏蔽,接受光刺激發(fā)出熒光信號(hào)。由于被釋放的熒光基團(tuán)數(shù)目和PCR產(chǎn)物數(shù)量是相對(duì)應(yīng)關(guān)系,且熒光強(qiáng)度同被釋放的熒光基團(tuán)的數(shù)目也是正比關(guān)系,因此該技術(shù)可對(duì)模板進(jìn)行準(zhǔn)確定量。TaqMan探針技術(shù)特異性好、準(zhǔn)確性高、假陽(yáng)性低、重復(fù)性比較好。但是需要設(shè)計(jì)特異性的探針,因此成本較高。
  分子信標(biāo)技術(shù)是一種呈發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)狀雙標(biāo)記寡核苷酸探針,環(huán)部與靶DNA序列互補(bǔ),為15~35 bp;莖部是由互相配對(duì)的堿基組成,但與靶DNA無(wú)序列同源性,約8 bp。在探針的5′端和3′端分別標(biāo)記熒光發(fā)射基團(tuán)和熒光淬滅基團(tuán)。當(dāng)溶液中的模板與分子信標(biāo)結(jié)合配對(duì)時(shí),分子信標(biāo)的構(gòu)象改變成鏈狀使得熒光發(fā)射基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分開(kāi),當(dāng)熒光基團(tuán)被激發(fā)時(shí),就發(fā)出熒光信號(hào)。與探針互補(bǔ)的靶分子數(shù)量越多,熒光信號(hào)也就越強(qiáng),從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)目的基因的定量檢測(cè)。分子信標(biāo)的方法優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng),熒光背景低。其缺點(diǎn)是設(shè)計(jì)困難,雜交探針不能*與模板結(jié)合,穩(wěn)定性較差,價(jià)格高。
微信掃一掃

郵箱:1170233632@qq.com

傳真:021-51870610

地址:上海市顧戴路2988號(hào)B幢7樓

Copyright © 2025 上海信帆生物科技有限公司版權(quán)所有   備案號(hào):滬ICP備13019554號(hào)-1    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

TEL:13764793648

掃碼加微信
永久免费看a片无码网站宅男| 亚洲AV无码A片在线观看| 无码人妻久久一区二区三区免费丨 | 久久久一本精品99久久精品36| 免费看裸裸体美女啪啪无遮挡| 国产成人猛男69精品视频| 动漫精品一区二区三区在线观看| 曰本女人与公GUO交酡视频A片| 无人视频在线观看完整版高清中文| 国产精品特级毛片一区二区三区| 免费观看黄色电影| 狂野殴美激情性BBBBBB| 狠狠干狠狠爱| 日本av在线观看| 日韩精品久久久久久免费| 哔哩哔哩在线看免费观看 | 国产一区二区久久A片免费| 精品国产成人亚洲午夜福利| 粗大猛烈进出高潮视频免费看| 国产免费久久精品99久久| 麻豆乱码国产一区二区三区| 野花日本韩国免费视频6| 被主人在厨房用黄瓜调教| 亚洲综合无码一区二区三区| 男女囗交大图片26交| 人妻VA精品VA欧美VA| 日本无翼乌邪恶大全彩H下拉式| 麻豆人妻无码性色AV专区| 巨胸喷奶水WWW视频网站| 蜜臀av国产精品久久久久| 国产偷抇久久精品A片69| 高潮小受站不住了GAY片| 天天躁日日躁狠狠躁欧美老妇小说| 久久久婷婷综合五月色麻豆| 国模冰冰大胆瓣开下部| 国产JIZZJIZZ全部免费看| 免费av在线| 麻豆AV天堂一区二区香蕉| 公交车一个接着一个C| 成全视频在线观看免费高清| 17岁日本高清免费观看完整版|