放射免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟
1.從集市買一只活雞現(xiàn)殺取血5ml(防止污染),放入盛有20ml Alsever’s液瓶中,混勻后置冰箱保存?zhèn)溆茫?周內(nèi)使用)。
2.使用前,取用Alsever’s液保存的新鮮雞血5ml,加入8ml的0.128 mol/L的NaCl溶液,小心混勻,1000 r/min離心5min,如此3次洗滌,zui后配成30%的雞紅細(xì)胞(CRBC)懸液。
3.取11支試管,按附表中所示測(cè)試溶液,分別取樣各3ml,作出標(biāo)記后,各管均加入紅細(xì)胞懸液2滴,混勻后靜置于溫室中,觀察各支試管中發(fā)生溶血的時(shí)間及其變化。
放射免疫試劑盒試驗(yàn)后觀察結(jié)果
1.試管內(nèi)液體分兩層:上層淺黃色透明,下層紅色不透明為不溶血(-),鏡檢紅細(xì)胞完好呈雙凹盤狀。
2.如果試管內(nèi)液體混濁,上層帶紅色者,稱不*溶血(+或++),鏡檢有部分紅細(xì)胞呈碎片。
3.如果試管內(nèi)液體變紅而透明者,稱*溶血(+++),鏡檢發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部呈碎片。
實(shí)驗(yàn)建議
1.雞血在離心時(shí),試管均需在扭力天平上平衡。
2.目測(cè)紅細(xì)胞體積或置于帶刻度的離心管中,加入生理鹽水配成30%的紅細(xì)胞懸液;
3.試管中有紅細(xì)胞和測(cè)試溶液時(shí),不應(yīng)強(qiáng)力搖晃,以免造成人為的紅細(xì)胞破裂。