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做好這幾步,輕松明白ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線分析步驟

更新時(shí)間:2023-08-03      瀏覽次數(shù):835

 做好這幾步,輕松明白ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線分析步驟


信帆生物提供高靈敏度,特異性好,即用型的ELISA試劑盒,長(zhǎng)期與全國(guó)各大高校合作,引用文獻(xiàn)上千篇。

ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線分析步驟
1.      標(biāo)曲和樣本孔的每個(gè)孔450nm的OD值減去630nm(或570nm)的OD值;
2.      再將獲得的標(biāo)曲和樣本孔數(shù)據(jù)分別減去空白孔Blank的OD值;
3.      以標(biāo)曲的濃度為橫坐標(biāo),以上算出的OD值為縱坐標(biāo),擬合標(biāo)曲(選擇R2值大于0.99的比較好的擬合方式,必要時(shí)可以刪除個(gè)別差異較大的標(biāo)曲點(diǎn)進(jìn)行擬合)
4.      計(jì)算樣本值,將樣本減去空白孔的OD值復(fù)制,選軟件中的“粘貼",得到的X值再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)就是最終的濃度值。


1.很多 Kit 可以同時(shí)用多種方式進(jìn)行擬合;
2.除了試劑盒推薦的擬合方式,其他的擬合方式也可以嘗試;
3.雙抗夾心法可以選擇直線,二次,四參數(shù)三種;可以直接擬合,也可以采用扣除 O 孔本底后取對(duì)數(shù)的方式;
4.取單數(shù)可以采用單對(duì)數(shù),或者雙對(duì)數(shù)法都可以;單對(duì)數(shù)就是 X 值(濃度值取對(duì)數(shù));

5.Logit-log的擬合方法是用于競(jìng)爭(zhēng)法的;競(jìng)爭(zhēng)法也可以用四參數(shù)或者五參數(shù)的方式進(jìn)行擬合。



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