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尿酸(UA)檢測(cè)試劑盒(磷鎢酸比色法)的操作步驟

更新時(shí)間:2023-11-30      瀏覽次數(shù):493

尿酸(UA)檢測(cè)試劑盒(磷鎢酸比色法)的操作步驟

 
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
尿酸(UA)是人體和動(dòng)物的代謝產(chǎn)物,正常人體尿液中產(chǎn)物主要為尿素,含少量尿酸,尿
酸高是人體的嘌呤因代謝發(fā)生紊亂,致使血液中尿酸增多而引起的一種代謝性疾病,體內(nèi)尿
酸每日的生成量和排泄量大約是相等。
尿酸(UA)檢測(cè)試劑盒(磷鎢酸比色法)檢測(cè)原理是樣本中的尿酸在堿性條件下被磷鎢酸
氧化為尿囊素和二氧化碳,磷鎢酸被還原成藍(lán)色化合物——鎢藍(lán),鎢藍(lán)生成量與尿酸含量呈
正比,通過分光光度計(jì)測(cè)定 600~660nm 吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得 UA 含量,該試劑盒
可用于檢測(cè)無溶血、無乳糜的血清樣本中尿酸的含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于
臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
自備材料:
1、蒸餾水或生理鹽水
2、離心管或小試管、離心機(jī)
3、分光光度計(jì)、比色皿
操作步驟(僅供參考)
1、準(zhǔn)備樣品:從待測(cè)樣本中分離出的血清或血漿不應(yīng)有溶血,直接檢測(cè),如待測(cè)樣本濃度
過高,可用蒸餾水或生理鹽水稀釋后檢測(cè),-20℃凍存。
2、配制 UA 工作試劑:按 UA Assay Buffer:UA 促進(jìn)劑=50:1 的比例混合,即成;4℃
保存 24H 有效。
3、UA 加樣:按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的 UA 濃度過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。
5、UA 檢測(cè):充分混勻,室溫放置 5min,空白管調(diào)零,分光光度計(jì)測(cè)定 630nm 處標(biāo)準(zhǔn)
管、測(cè)定管的吸光度(記為 標(biāo)準(zhǔn)、測(cè)定)。
計(jì)算:
血清(漿)尿酸(μmol/L)=(測(cè)定/標(biāo)準(zhǔn))×400
式中:測(cè)定=測(cè)定管的吸光度
標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度
400=尿酸標(biāo)準(zhǔn)(400μmol/L)
參考區(qū)間
注意事項(xiàng):
1、 測(cè)定各孔時(shí)各孔溫度均需達(dá)到室溫,否則影響結(jié)果。
2、 紅細(xì)胞內(nèi)存在多種非特異性還原物質(zhì),所以用血清或血漿測(cè)定比用全血好。
3、 不宜用草酸鉀作為抗凝劑。
4、 顯色后需準(zhǔn)時(shí)測(cè)定,放置時(shí)間過長易變濁。
5、 血清和尿液樣品中的尿酸室溫下可穩(wěn)定 3 天,尿液樣品冷藏后,可引起尿酸鹽沉淀,可調(diào)節(jié) pH 值至 7.5~8.0,并將樣本加熱至 50℃,再行測(cè)定。
6、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:6 個(gè)月有效;4℃運(yùn)輸,4℃保存。
附錄:參考標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍:測(cè)定尿酸標(biāo)準(zhǔn)在 400μmol/L 時(shí),通過酶標(biāo)儀測(cè)定其630nm 吸光度多在 0.1~0.3 之間。測(cè)定尿酸標(biāo)準(zhǔn)在 50、100、200、400、600、800μmol/L 時(shí)吸光度,據(jù)此 作出其標(biāo)準(zhǔn)曲線如下:
注意:由于檢測(cè)儀器和操作手法等條件的不同,參考值范圍會(huì)有波動(dòng),該值僅供參考,對(duì)于要求計(jì)算含量的,可進(jìn)行多點(diǎn)測(cè)定;根據(jù) 測(cè)定經(jīng)驗(yàn)顯示標(biāo)準(zhǔn)品濃度在 25μmol/L 以下,標(biāo)準(zhǔn)品濃度在 600μmol/L 以上,標(biāo)準(zhǔn)曲線會(huì)有偏差。
 
尿酸(UA)檢測(cè)試劑盒(磷鎢酸比色法)的操作步驟


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