ELISA測定人尿金屬硫蛋白的初步應(yīng)用---人ELISA試劑盒的使用小例子
更新時間:2013-05-03
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金屬硫蛋白廣泛存在于機體各臟器組織中,其作用尚未*闡明,但在胚胎的發(fā)育分化,微量元素的代謝平衡.抗氧化損傷等方面起著重要的病理和生理作用.它受多種應(yīng)激因素,尤其是有毒金屬和類金屬 如鎘/汞/砷等誘導(dǎo),使他在研究環(huán)境一機體交互作用中備受關(guān)注.MT的檢測時對其進行深入研究的基礎(chǔ),目前多見于動物實驗,而人尿MT的測定,僅有少量報道,本文將競爭ELISA法初步用于尿樣MT的檢測,現(xiàn)報告如下:
1/ 材料和方法
1/1 試劑和儀器
抗MT兔血清(一抗,由上海信帆生物科技有限公司提供);二抗生物素化羊抗兔IGG(由上海信帆生物有限公司提供)為VECTO集團產(chǎn)品;親和素化辣根過氧化酶(購自DAKO公司)底物OPD為SIGMA公司產(chǎn)品;所有試劑均為分析純,磷酸緩沖溶液按D。CATTY配方配制。聚苯乙烯酶標購自上海信帆生物科技有限公司;酶標儀紫外分光光度儀為日本島津公司產(chǎn)品。WESTERN BLOTTING器材購自bio-rad公司。
1/2 人的MT分離純化
1/3 MT競爭elisa的步驟