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直接抗人球蛋白試劑盒到貨一批,歡迎聯(lián)系!

更新時間:2018-03-30      瀏覽次數(shù):1518

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[產(chǎn)品名稱]  

通用名稱:直接抗人球蛋白試劑盒

英文名稱:Direct Anti-human Globulin Reagents

[包裝規(guī)格]   抗IgG,C3d(多特異性)   10ml/支,1支/盒

             抗IgG                  5ml/支,1支/盒

             抗C3d                  5ml/支,1支/盒

[預(yù)期用途] 抗球蛋白試驗(Coombs試驗)是測定結(jié)合在紅細胞上的抗體和/或補體的主要方法。直接Coombs試驗是檢測體內(nèi)已被抗體和/或補體致敏的紅細胞。間接Coombs試驗通過血清與細胞的孵育,證實抗體和/或補體與紅細胞在體外的結(jié)合。根據(jù)醫(yī)療器械體外診斷試劑注冊分類,本試劑暫時只用于直接抗球蛋白試驗。不同抗人球蛋白試劑的用途見表1。

表1 不同抗人球蛋白試劑的用途

試    劑

用   途

抗IgG,C3d

(多特異性)

抗IgG

抗C3 d

直接抗球蛋白試驗

自身免疫溶血性貧血的研究

新生兒溶血病的研究

-

輸血反應(yīng)的研究

藥物致敏紅細胞的研究

[檢驗原理]  抗體分子和補體成份都是球蛋白。用人球蛋白免疫動物使其產(chǎn)生抗體即抗人球蛋白。抗人球蛋白試劑可凝集被人球蛋白致敏的紅細胞。抗人球蛋白試劑可以和致敏在紅細胞上人球蛋白反應(yīng),通過橋梁作用使致敏紅細胞出現(xiàn)凝集,呈現(xiàn)陽性反應(yīng)。

試驗過程中如果存在血清,其中的游離球蛋白極易中和抗人球蛋白試劑,使試驗出現(xiàn)假陰性結(jié)果,因此紅細胞必須經(jīng)過充分洗滌。

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[適用范圍] 自身或同種免疫溶血性疾病的研究。

[主要組成成分] 直接抗人球蛋白試劑盒有三種規(guī)格,不同批號試劑盒中各組份可以互換:

抗IgG,C3d(多特異性) 10ml/支,1支/盒;

    抗IgG               5ml/支,1支/盒;

    抗C3d               5ml/支,1支/盒;

試劑組成成分如下:

抗IgG,C3d(多特異性):價抗IgG,價抗C3d,氯化鈉,磷酸二氫鉀,磷酸氫二鈉,穩(wěn)定劑;

抗IgG:價抗IgG,氯化鈉,磷酸二氫鉀,磷酸氫二鈉,穩(wěn)定劑;

抗C3d:價抗C3d,丙種球蛋白(10%),氯化鈉,磷酸二氫鉀,磷酸氫二鈉,穩(wěn)定劑。

[儲存條件及有效期] 2-8℃保存,請勿反復(fù)凍融。

儲存條件下有效期為24個月。

[樣本要求]

應(yīng)用EDTA抗凝標本,可反映體內(nèi)紅細胞被補體致敏的真情況。若懷疑冷抗體引起的直接抗球蛋白試驗陽性,其血液標本凝固應(yīng)保持在37℃,直到血清被分離出來為止。

[檢驗方法]

1.     標本的收集:見[樣本要求]

2.     直接抗球蛋白試驗:

2.1 將1滴受檢者3%紅細胞懸液加入干凈的小試管中(75×12mm),用鹽水洗滌3次[以3400轉(zhuǎn)/分(1000g),離心1分鐘]。每次洗滌后,將上清液全部倒出。

2.2 加入2滴抗IgG, C3d (多特異性)或抗IgG或抗C3d,以3400轉(zhuǎn)/分(1000g),離心15秒,用肉眼或借助光鏡觀察凝集,并按程度記錄結(jié)果。

2.3 判斷結(jié)果須持一定角度輕輕地搖動試管直到松動所有的細胞,然后反復(fù)傾斜試管,直到均勻的細胞懸液(陰性)或者凝集物(陽性)為止。

2.4 如陰性結(jié)果,在室溫中放置5-10分鐘,再離心一次,重讀結(jié)果。這樣做,陰性反應(yīng)有時會變成陽性。

    注意:僅對C3d和IgA致敏紅細胞有增強作用,IgG致敏細胞反而會變?nèi)酰ㄒ娮⒁馐马棧?/span>

3.     陽性對照(IgG抗D致敏細胞):

3.1 每批新的試劑,或在4℃保存時間過長,需做陽性對照試驗,至少每月一次。1滴陽性對照細胞加2滴直接抗人球蛋白試劑,離心判定結(jié)果。

3.2 在試驗中,于判為陰性的試管內(nèi)加入1滴陽性對照細胞,再離心,然后重懸浮,判定結(jié)果。如果zui初洗滌能充分除去所有未結(jié)合的球蛋白,結(jié)果為陽性。這是一個重要的對照,因為這是檢測細胞是否洗滌充分的*方法。

3.3 陽性對照細胞(IgG抗D致敏細胞)制備: 1份市售抗D(IgG)試劑(效價≥1:8)+1份Rh(D)陽性O(shè)型紅細胞混勻,370C水浴30分鐘,用生理鹽水三洗,配成3%紅細胞懸液,當(dāng)天使用。

[檢驗結(jié)果的解釋] 

陽性反應(yīng)——出現(xiàn)紅細胞凝集。表示紅細胞上有相應(yīng)抗體存在。

陰性反應(yīng)——紅細胞不凝集。表示紅細胞沒有相應(yīng)抗體存在。

[檢驗方法的局限性]某些文獻報告指出使用抗IgG測定抗體偶爾會失敗,可依靠含有抗C3成分的多價抗球蛋白試劑測定。沒有被IgG 測得的抗體在某些病例中可能有研究意義??笽gG可用在抗體篩選和相容性試驗中,但必須認識到它的局限性。

[產(chǎn)品性能指標]

1.抗IgG

1.1外觀:澄清透明,無雜質(zhì);

1.2靈敏度試驗:分別與強抗體[抗D(IgG)],中等強度抗體(抗Jka)和弱抗體(抗Fya)致敏細胞反應(yīng),結(jié)果均為陽性;

1.3效價: 與IgG (抗D)致敏細胞凝集效價≥1:4;

1.4 特異性試驗:

1.4.1陰性對照試驗:與加入AB血漿的Rh(D)陽性細胞反應(yīng),結(jié)果為陰性。

1.4.2陽性對照試驗:與抗D(IgG)致敏細胞反應(yīng),結(jié)果為陽性。

2.抗C3d

2.1外觀:澄清透明,無雜質(zhì);

2.2效價: 與C3致敏細胞凝集效價≥1:4;

2.3特異性試驗

2.3.1陰性對照試驗:與加入抗D(IgG)的Rh(D)陽性細胞反應(yīng),結(jié)果為陰性。

2.3.2陽性對照試驗:與10%蔗糖溶液致敏細胞反應(yīng),結(jié)果均為陽性。

3.抗IgG,C3d

3.1外觀:澄清透明,無雜質(zhì);

3.2靈敏度試驗:分別與強抗體[抗D(IgG)],中等強度抗體(抗Jka)和弱抗體(抗Fya)致敏細胞反應(yīng),結(jié)果均為陽性;

3.3效價: 與IgG (抗D)致敏細胞凝集效價≥1:4;

與C3致敏細胞凝集效價≥1:1;

3.4特異性試驗

3.4.1陰性對照試驗:與加入AB血漿的Rh(D)陽性細胞反應(yīng),結(jié)果為陰性。

3.4.2陽性對照試驗:與抗D(IgG)致敏細胞反應(yīng),結(jié)果為陽性;

與10%蔗糖溶液致敏細胞反應(yīng),結(jié)果均為陽性。

[注意事項] 

1.紅細胞洗滌不充分,微量殘留的未結(jié)合的球蛋白將要中和抗人球蛋白試劑。

2.直接抗球蛋白試驗的試管在初讀結(jié)果之后,再放在室溫中5-10分鐘。這樣孵育之后,若細胞被C3d或IgA所致敏時,重新離心觀察結(jié)果可使陰性試驗轉(zhuǎn)變?yōu)殛栃越Y(jié)果。而IgG致敏的紅細胞在孵育以后可能反應(yīng)更弱。

3.試劑含有0.1%W/V疊氮鈉。如果攝入會中毒。

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