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上海信帆生物開展了麗春紅如何配置的培訓活動

更新時間:2020-07-14      瀏覽次數(shù):1148

 上海信帆生物開展了麗春紅如何配置的培訓活動

很多實驗室的同學需要麗春紅的染色試劑,但是對于配置方法并不是特別了解,上海信帆生物正對該染色液的配置特別開展了一次別開生面的培訓活動,讓大家對這個都有了有一個全新的認識和了解,下面讓我們一起走進培訓室,來了解一下吧!

Molecular Formula: C 22 H 12 N 4 Na 4 O 13 S 4

Molecular Weight::760.6

CAS Number: 6226-79-5

λ : 520 nm (water)

麗春紅(Ponceau S)也稱猩紅,可以用于PVDF膜、硝酸纖維素膜(nitrocellulose membrane)和醋酸纖維素膜(cellulose acetate membrane)上的蛋白的檢測。麗春紅帶負電荷,可以與帶正電荷的氨基酸殘基結(jié)合,同時麗春紅也可以與蛋白的非極性區(qū)相結(jié)合,從而形成紅色的條帶。麗春紅染色的靈敏度不及考馬斯亮藍染色。

麗春紅對蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸餾水,PBS或其它適當溶液洗去。因此,蛋白質(zhì)N端測序時將SDS-PAGE膠上的蛋白轉(zhuǎn)移到PVDF膜,用麗春紅染色后將目的條帶切下用于測序。

注意:麗春紅染色液不適用于尼龍膜上的蛋白的檢測。

使用說明

將PVDF膜、硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜浸沒在麗春紅染色液中,搖動5-10分鐘或更長時間;取出印跡膜,用蒸餾水,PBS或其它適當溶液漂洗2-3次,可出現(xiàn)清晰條帶,記錄結(jié)果;用蒸餾水,PBS或其它適當溶液漂洗2-3次,每次3-5分鐘,去除麗春紅,進行后續(xù)的WB檢測。

補充:麗春紅染色液也可以直接用來染PAGE膠,不過,在染色之前好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下PAGE膠,起到固定蛋白的作用。

麗春紅染色液的配制

常用的麗春紅染色液有兩種:一種用乙酸配制,另外一種用三氯yi酸(TVA)和5-磺基水楊酸(5-Sulfosalicylic acid)配制。配制方法如下:

一、用乙酸配制成分:0.1%(w)麗春紅,5%(v)乙酸,ddH 2 O。

4 ℃保存,不要凍上。也可以配成“0.2%(w)麗春紅,3%(v)乙酸,ddH 2 O”。

二、用三氯yi5-磺基水楊酸成分:2% (w)麗春紅,30%的三氯yi,30%的5-磺基水楊酸。

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