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細(xì)胞中的鐵離子檢測試劑盒這么操作更準(zhǔn)確

更新時間:2021-03-31      瀏覽次數(shù):4118

細(xì)胞中的鐵離子檢測試劑盒這么操作更準(zhǔn)確

上海信帆生物供應(yīng)鐵離子檢測試劑盒,操作簡單,適應(yīng)樣本多樣,我們還供應(yīng)血清鐵檢測試劑盒,組織鐵檢測試劑盒,鐵蛋白試劑盒等等!

描述:鐵是人體必需的元素之一,對人體的新陳代謝和身體健康具有重要作用,血液中鐵的含量不足,就會造成缺鐵性貧血。鐵存在于人體所有的細(xì)胞內(nèi),各組織、器官包括各內(nèi)分泌腺都含有鐵。肝臟、脾臟和肺組織內(nèi)含量較為豐富。成人體內(nèi)含鐵35克,大部分都以蛋白質(zhì)復(fù)合物形式存在,極少部分以離子的形態(tài)存在。本試劑盒采用亞鐵嗪比色法可以定量細(xì)胞鐵離子,線性范圍5~300uM。產(chǎn)品包括標(biāo)準(zhǔn)品和空白對照,本試劑盒可進(jìn)行100個樣品的檢測。

規(guī)格:100

儲存:4保存  6個月有效

操作步驟:

1. 樣品準(zhǔn)備(以24孔板為例):

將含鐵元素DMEM培養(yǎng)過的細(xì)胞用冷的PBS 2ml洗兩遍,將PBS吸棄(若不馬上檢測可將其凍存于-20)。200ul/孔裂解液裂解細(xì)胞,置于搖床裂解2h。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:用試劑盒提供的稀釋用液將3mM 的標(biāo)準(zhǔn)品母液稀釋為:300 uM150uM、75uM37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀釋并設(shè)置0濃度對照反應(yīng)管。

3. 將緩沖液與4.5%高錳酸鉀溶液按1:1混勻,稱為混液A。 注意:高錳酸鉀溶液需要自備。

4. 參考下表使用1.5ml離心管,設(shè)置空白對照管、標(biāo)準(zhǔn)品管和樣品管。如果樣品中的鐵元素含量過高,用裂解液適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。

 

空白對照

稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品

裂解的樣品

稀釋用液

100μl

 

混液A

100μl

100μl

100μl

樣品

100μl

標(biāo)準(zhǔn)品工作液

100μl

 

 

5. 混勻,60 孵育1h。

6. 冷卻至室溫,將管蓋與管壁上的液滴離心入管底。

7. 加入30ul 鐵離子檢測劑,混勻,室溫孵育,30min。

8. 200ul 96孔板,在550nm測定吸光度。如果不能測定550nm,也可以在540nm~580nm范圍內(nèi)檢測。

9. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計算鐵離子濃度。

 

說明:

1. 本試劑盒不受錳離子、鎂離子、鎳離子和鋅離子等的干擾。
2. 操作過程中,樣品與試劑等避免與鐵器接觸,以防污染。

3. 所測樣本的值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限,應(yīng)稀釋樣品后重新測定。

4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作,檢測試劑有腐蝕性,請小心操作,若不慎沾到皮膚上請馬上用清水沖洗干凈。

5. 該試劑盒僅供科學(xué)研究使用。

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