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怎樣判斷生化法試劑盒是否適合使用?

更新時(shí)間:2021-06-24      瀏覽次數(shù):729
   對新的生化法試劑盒,我們首先要查看其專業(yè)是否齊全,是否具有國家食品藥品監(jiān)督管理總局的相關(guān)批號,是否為合法有效試劑,是否有相關(guān)的研究試驗(yàn)驗(yàn)證等。其次,在本實(shí)驗(yàn)室,可做以下工作來進(jìn)行驗(yàn)證是否適合使用。
  一、試劑空白吸光度
  用蒸餾水做空白,用空白液加入試劑作為樣品測試,在測試主波長下,記錄測試啟動時(shí)的吸光度(A1)和約5分鐘后的吸光度(A2),A2測試結(jié)果即為試劑空白吸光度測定值,應(yīng)符合生物試劑企業(yè)給定范圍。這是判定試劑質(zhì)量的一個(gè)有效指標(biāo)。
  二、試劑空白變化速率
  對于生化法試劑盒,用空白液加入試劑作為樣品測試時(shí),在測試主波長下,記錄測試啟動時(shí)的吸光度(A1)和約5分鐘(T)后的吸光度(A2),計(jì)算試劑空白吸光度變化率(DA/min),應(yīng)不超過生物試劑企業(yè)給定值。測定試劑空白吸光度變化(ΔA/min),用來檢查試劑在工作狀態(tài)下的穩(wěn)定性。但事實(shí)上,試劑空白吸光度變化速率無法反映試劑盒的穩(wěn)定性,試劑空白吸光度變化速率主要反映干擾程度和儀器的穩(wěn)定性。
  三、分析靈敏度
  用吸光度差值(ΔA)或吸光度變化(ΔA/min)來表示單位濃度的被測物反應(yīng)所引起的信號變化,其含義類似摩爾消光系數(shù),應(yīng)符合生物試劑企業(yè)給定范圍。需要注意的是,分析靈敏度不是越高越好,以適合待測物檢測范圍為原則。分析靈敏度一般用于批間比較,較能反映制造商的配方、原料的一致性。
  四、線性范圍
  取高濃度樣品和低濃度樣品按不同比例混合成5個(gè)濃度做線性試驗(yàn)。線性范圍內(nèi)的分析性能應(yīng)符合如下要求:①線性性相關(guān)系數(shù)r應(yīng)≥0.990;②線性偏差應(yīng)不超過生物試劑企業(yè)給定值。試劑(盒)的線性范圍越寬,研究復(fù)測幾率越小,但與樣品/試劑比例成反比。
  五、重復(fù)性
  1.批內(nèi)重復(fù)性在重復(fù)性條件下,用高、中、低三個(gè)水平濃度(高、低濃度應(yīng)超過參考區(qū)間20%~30%,中濃度水平在參考區(qū)間之內(nèi))的控制血清或新鮮科研血清測試試劑,重復(fù)測試至少10次。
  2.批間重復(fù)性用質(zhì)量控制血清測試3×3(3個(gè)批號,每個(gè)批號取3瓶)批間差,較能反映制造商的配方、原料的一致性。干粉或凍干試劑還需測定批內(nèi)瓶間差,測定同一批號的試劑20瓶,用變異系數(shù)(CV)來表示。變異系數(shù)(CV)不超過生物試劑企業(yè)給定值。
  六、準(zhǔn)確度
  1.相對偏差直接用生化法試劑盒測定參考物質(zhì)(平行3次),評價(jià)測定均值與靶值的偏離程度。也可用由參考方法定值的高、中、低三個(gè)濃度的人混合血清,用試劑盒平行測定3次,計(jì)算均值與定值的相對偏差。
  2.比對試驗(yàn)既無參考物質(zhì)、參考血清,也無標(biāo)準(zhǔn)品,也可用比對試驗(yàn)來驗(yàn)證準(zhǔn)確度。
  七、校準(zhǔn)品溯源、質(zhì)控品賦值
  1.校準(zhǔn)品溯源性根據(jù)GB/T21415及有關(guān)規(guī)定提供校準(zhǔn)品的來源、賦值過程及測量不確定度等內(nèi)容,明確溯源途徑。
  2.質(zhì)控品賦值有效性質(zhì)控品的測定結(jié)果應(yīng)在試劑盒規(guī)定的范圍內(nèi)。
  八、穩(wěn)定性
  1.效期穩(wěn)定性取已到效期的試劑盒按以上評價(jià)方法對試劑盒性能指標(biāo)進(jìn)行評價(jià)。
  2.熱穩(wěn)定性試驗(yàn)生化試劑盒一般置2-8℃保存,為了快速有效地評價(jià)試劑盒的穩(wěn)定性,可以用加速試驗(yàn)來估計(jì)。
  3.開瓶穩(wěn)定性干粉試劑開瓶后(復(fù)溶后)在規(guī)定的儲存條件下保存至預(yù)期時(shí)間內(nèi),產(chǎn)品的性能至少應(yīng)符合線性和準(zhǔn)確度的要求。
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