白細胞介素6（IL-6）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒簡介

    IL-6作用的靶細胞很多，包括巨噬細胞、肝細胞、靜止的T細胞、活化的B細胞和漿細胞等；其生物效應(yīng)也十分復(fù)雜，曾稱為B細胞刺激因子2（bsf-2）、26KD蛋白、B細胞分化因子（bCDf）、肝細胞刺激因子（hsf）等。①促進T細胞表面IL-2r的表達，增強IL-1和TNF對TH細胞的致有絲分裂作用。②作為肝細胞刺激因子，在感染或外傷引起的急性炎癥反應(yīng)中誘導(dǎo)急性期反應(yīng)中誘導(dǎo)急性期反應(yīng)蛋白的合成，其中以淀粉狀蛋白a和c-反應(yīng)蛋白增加尤為明顯。③促進B細胞增殖、分化并產(chǎn)生抗體；多發(fā)性骨髓瘤的惡變B細胞既能產(chǎn)生IL-6，又能對IL-6發(fā)生應(yīng)答，提示IL-6可能作為這些細胞的自分泌性生長因子。④IL-6還能有效地促進TNF和IL-1誘導(dǎo)的惡病質(zhì)；促進糖皮質(zhì)激素合成；刺激破骨細胞活性和角質(zhì)細胞生長；還能促進骨髓造血的功能。IL-6不能刺激相應(yīng)細胞分泌其它細胞因子，在生理濃度下對免疫細胞的自分泌作用亦比較弱，提示其主要免疫學(xué)功能是加強其它細胞因子的效果。IL-6可由多種細胞合成，包括活化的T細胞和B細胞、單核－巨噬細胞、內(nèi)皮細胞、上皮細胞以及成纖維細胞等。人類IL-6基因位于第7號染色體上；IL-6分子量在21～30KD之間，其差異是由于肽鏈的糖基化和磷酸程度不同所致。IL-6由2條糖蛋白鏈組成；1條為α鏈，分子量80KD；另1條為β鏈，分子量130KD。α鏈缺少胞內(nèi)區(qū)，只能以低親合性與IL-6結(jié)合，所形成的復(fù)合物迅即與高親和性的β鏈結(jié)合，通過β鏈向細胞內(nèi)傳遞信息。

甘油三酯（TG）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒組成

試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存

說明書 1 份 1份

封板膜 2片（48） 2片（96）

密封袋 1 個 1個

酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存

標準品：2.7 mmol/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存

標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存

酶標試劑 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

樣品稀釋液 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

顯色劑 A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

顯色劑 B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

終止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存

濃縮洗滌液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30 倍）×1瓶 2-8℃保存

樣本處理及要求

1. 血清：室溫血液自然凝固 10-20 分鐘，離心 20分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細收集上

清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇 EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離心

20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次

離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細收集上清，保存過程

中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心 20分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用 PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞

濃度達到 100萬/ml 左右。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分） 。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4） ，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分） 。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上

進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含 NaN3的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

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