改良天狼猩紅染色掃描分析

服務(wù)介紹：

膠原纖維（Collagen Fiber)是結(jié)締組織中分布最-廣泛含量最多的一種纖維，廣泛分布于各種臟器，其中Ⅰ型膠原纖維主要分布于成人皮膚、骨、肌腱等；Ⅱ型膠原纖維主要分布于軟骨、椎間盤等；Ⅲ型膠原纖維主要分布于胚胎組織、嬰兒皮膚、血管、胃腸道等；Ⅳ型膠原纖維主要分布于基膜中；V型膠原纖維多位于頭發(fā)、胎盤等處。區(qū)分Ⅰ、Ⅲ型膠原最-好的染色方法就是天狼猩紅染色，天狼猩紅是強酸性染料，易與膠原分子中的堿性基團結(jié)合，吸附牢固；膠原纖維有正的單軸雙折射光的屬性，與天狼猩紅染料結(jié)合后，可增強雙折射，提高分辨率，在偏振光顯微鏡下觀察，Ⅰ型膠原較粗大，呈強雙折射為黃色或紅色，而Ⅲ型膠原較細小，為弱折射，呈綠色。

傳統(tǒng)的天狼猩紅染液由苦-味酸配制，由于苦-味酸有易燃易爆的風(fēng)險，吸入、眼睛接觸、皮膚接觸、吞咽等有毒，危險系數(shù)較高。因此，我司推出了安全系數(shù)相對較高的改良天狼猩紅染液。

本改良天狼猩紅染色試劑盒主要由天狼猩紅染液A液、天狼猩紅染液B液和天狼猩紅染液C液組成，不含苦-味酸。主要用于各種組織病變時對膠原纖維異?；蛟錾难芯?，在偏振光鏡下對各種纖維化病變的分型和分級研究也有一定的幫助。為保證染色成像效果，染色后一個月內(nèi)成像。

染完色的切片置于數(shù)字切片掃描儀下進行組織全景掃描成像。切片數(shù)字掃描是通過控制顯微成像系統(tǒng)和切片以一定的規(guī)則運動，采集多張連續(xù)的高分辨率顯微圖像再無縫拼接生成一張高分辨率的組織切片全景圖像。該圖像包含了玻片上所有的信息，可在電腦上用瀏覽軟件任意放大和縮小，任意部位觀察采圖，是真正脫離顯微鏡的閱片方式。

使用軟件對天狼猩紅明場全景掃描圖像進行半定量分析，得到紅色膠原面積、組織面積、紅色膠原面積占組織面積比率等數(shù)據(jù)，用以評價組織內(nèi)膠原含量。 

分析數(shù)據(jù)

實驗大體流程：

石蠟切片脫蠟至水-天狼猩紅染液A液媒染-天狼猩紅染液B液預(yù)染-天狼猩紅染液C液染色-酒精脫水-二甲苯透明-中性樹膠封片-玻片數(shù)字掃描儀掃描全景成像軟件分析紅色膠原纖維面積，組織面積、紅色膠原面積占組織面積比率等數(shù)據(jù)。

結(jié)果判讀：

 送樣運輸要求：

1. 樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上，常溫運輸送樣。切勿固定時間過長，切勿冷凍結(jié)冰。

2.石蠟切片常溫運輸，冰凍切片-20℃保存運輸。