AB-PAS染色實驗代測

AB-PAS染色簡介：

某些細胞如胃腸的杯狀細胞能分泌粘稠的分泌物，含有大量的糖稱粘多糖。中性粘液物質(zhì)含有氨基己糖和游離的己糖基，酸性粘液物質(zhì)也含有氨基己糖并含有各種酸根。此方法先染阿利新藍染酸性粘液物質(zhì)為藍色，并阻斷酸性粘液物質(zhì)的羧酸分子中的乙二醇被高碘酸氧化生物試劑二醛而著紅色。只有中性粘液物質(zhì)的乙二醇基被高碘酸生成二醛后與雪夫試劑中的無色品紅作用生成紅紫色復(fù)合物。

染色實驗步驟（僅供參考）：

1、切片脫蠟至水。

2、阿利新藍染液浸染或滴染5-10min。稍水洗。

3、0.5%高碘酸水溶液氧化5-10min。

4、流水沖洗數(shù)分鐘蒸餾水換洗兩次。

5、雪夫試劑暗處浸染或滴染15~30min。

6、流水沖洗5-10min。  

7、蘇木素復(fù)染核1min左右，鹽酸酒精分化，氨水返藍。

8、95%酒精I 5min-95%酒精II 5min-無水乙醇I 5min-無水乙醇II 5min脫水，二甲苯透明中性樹膠封固。（一定要濕封，在組織上的二甲苯未揮發(fā)完組織變干之前封片，否則易出現(xiàn)黑色的結(jié)晶狀物即空氣結(jié)晶）。

染色結(jié)果：

糖原、中性粘液物質(zhì)呈紅色，酸性粘液物質(zhì)呈藍色，混合性粘液物質(zhì)呈藍紫色或紫藍色，胞核呈藍色。

注意事項：

1、高碘酸溶液為透明溶液，長時間染色如果沒有帶入雜質(zhì)的話此溶液一直是透明的，所以無法從常規(guī)的顏色辨別高碘酸的好壞，只有定期更換，根據(jù)標(biāo)本的多少1~2月更換一次。

2、雪夫試劑要放入冰箱保存，臨用前半小時取出恢復(fù)至室溫，用后又倒回原瓶內(nèi)放冰箱保存；雪夫試劑出現(xiàn)淡紅色就不能繼續(xù)使用了。

3、如果沒有要求，可以不染核，要染核的話染色一定要淺。因為酸性粘液物質(zhì)著藍色，如果核藍色太深對比不明顯。

4、一定要先染阿利新藍后染PAS，否則藍色著染少而淺結(jié)果不準(zhǔn)確，原因是酸性粘液物質(zhì)的羧酸分子中的乙二醇被高碘酸氧化生物試劑二醛與雪夫試劑中的無色品紅作用生成紅紫色復(fù)合物后再難跟阿利新藍結(jié)合。

AB-PAS染色實驗代測